一、要怎麼分離豬鏈球菌二型？
可以從血液中分離病原，或是從死亡的病患(畜)之腦、關節及其他臟器分離病原。以接種環釣取病材內部病菌至綿羊血液培養基，37℃24小時初步培養。
二、要怎麼確定是不是豬鏈球菌二型？
自初步培養的菌落中選取小且灰白色圓形菌落，且為革蘭氏陽性球菌觸媒反應陰性者，以接種環釣單一菌落至綿羊血液培養基，37℃24小時進行菌落分離純化。有時候鏈球菌生長較慢，可能需要48小時培養才有足夠的菌量進行試驗。
分離的菌落可以進行API 20 Strep檢驗套組的檢定，4-24小時內可以知道檢定結果。若對生化反應有疑問，可以重複做有疑問之生化試驗。
並可以16S rDNA位置設計之特異性引子進行PCR，或是以抗血清與菌體結合而有凝集反應，或是以免疫螢光抗體與菌體結合，用以鑑定豬鏈球菌二型。
同時進行抗生素敏感性試驗，找出對此菌仍有抑制效果的抗生素。
此外，以腦脊液或腦組織做抹片染色，可見大量嗜中性球及被吞噬的細菌。
類鼻疽診斷之Q&A 黃春申
一、要怎麼分離類鼻疽伯克霍得菌？
由患者(畜)血液、痰、膿汁等病材直接分離病原菌是最直接的診斷方法，不然以病材乳劑注入天竺鼠腹部用以增殖病原菌，數日後再從實驗鼠的腫脹處膿汁分離病原。以接種環釣取病材內部病菌至綿羊血液培養基，37℃24小時初步培養。
二、要怎麼確定是不是類鼻疽伯克霍得菌？
自初步培養的菌落中選取混濁、稍皺摺灰白色大圓形或橢圓形菌落之革蘭氏陰性桿菌，以接種環釣單一菌落至新鮮培養基，37℃24小時進行菌落分離。
所分離之菌落釣至TSI培養基，類鼻疽菌在TSI產生反應有：斜面底部皆呈現黃色、不產硫化氫及其它氣體。
分離的菌落可以進行API 20 NE檢驗套組的檢定，24-48小時內可以知道檢定結果。若對生化反應有疑問，可以重複做有疑問之生化試驗。
並可以16S rDNA位置設計之特異性引子進行PCR，或是以免疫螢光抗體與菌體結合，用以鑑定類鼻疽桿菌。
同時進行抗生素敏感性試驗，找出對類鼻疽桿菌仍有抑制效果的抗生素。
提供者: 黃春申 |